Ген устойчивости к карбапенемам (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Название продукта
Набор для определения гена устойчивости к карбапенемам HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (флуоресцентная ПЦР)
Эпидемиология
Карбапенемы – это атипичные β-лактамные антибиотики с самым широким спектром антибактериального действия и самой сильной антибактериальной активностью. Благодаря устойчивости к β-лактамазам и низкой токсичности, они стали одним из важнейших антибактериальных препаратов для лечения тяжёлых бактериальных инфекций. Карбапенемы обладают высокой устойчивостью к плазмидным β-лактамазам расширенного спектра действия (БЛРС), хромосомам и плазмидным цефалоспориназам (ферментам AmpC).
Канал
| ПЦР-Микс 1 | ПЦР-Микс 2 | |
| ФАМ | ИМП | ВИМ |
| ВИК/ХЕКС | Внутренний контроль | Внутренний контроль |
| CY5 | НДМ | КПК |
| РОКС | ОХА48
| ОХА23 |
Технические параметры
| Хранилище | ≤-18℃ |
| Срок годности | 12 месяцев |
| Тип образца | Мокрота, чистые колонии, ректальный мазок |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103КОЕ/мл |
| Специфичность | а) Набор обнаруживает стандартизированные компанией отрицательные референсы, и результаты соответствуют требованиям соответствующих референсов. б) Результаты теста на перекрестную реакцию показывают, что данный набор не имеет перекрестной реакции с другими респираторными патогенами, такими как Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, респираторный аденовирус, Enterococcus или образцами, содержащими другие гены лекарственной устойчивости CTX, mecA, SME, SHV, TEM и т. д. c) Противоинтерференционные вещества: для теста на интерференцию выбраны муцин, миноциклин, гентамицин, клиндамицин, имипенем, цефоперазон, меропенем, гидрохлорид ципрофлоксацина, левофлоксацин, клавулановая кислота, рокситромицин, и результаты показывают, что вышеупомянутые интерферирующие вещества не оказывают интерферирующей реакции на обнаружение генов устойчивости к карбапенемам KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM и IMP. |
| Применимые инструменты | Системы ПЦР в реальном времени Applied Biosystems 7500 Системы ПЦР в реальном времени QuantStudio®5 Системы ПЦР в реальном времени SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Система ПЦР в реальном времени LightCycler®480 Система детекции ПЦР в реальном времени LineGene 9600 Plus (ФКД-96А，ХанчжоуБиотехнология) Количественный термоциклер в реальном времени MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Система ПЦР в реальном времени BioRad CFX96 Система ПЦР в реальном времени BioRad CFX Opus 96 |
Рабочий процесс
Вариант 1.
Рекомендуемый реагент для экстракции: набор для макро- и микротестирования ДНК/РНК (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (который можно использовать с автоматическим экстрактором нуклеиновых кислот Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) производства компании Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Добавьте 200 мкл физиологического раствора к осадку таллома. Последующие шаги должны соответствовать инструкции по экстракции, рекомендуемый объём элюата составляет100 мкл.
Вариант 2.
Рекомендуемый реагент для экстракции: реагент для экстракции и очистки нуклеиновых кислот (YDP302) производства Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Экстракцию следует начинать в строгом соответствии с шагом 2 инструкции по применению (добавьте 200 мкл буфера GA к осадку таллома и встряхивайте до полного суспендирования таллома). Для элюирования используйте воду, свободную от РНКаз/ДНКаз; рекомендуемый объём элюата — 100 мкл.
Вариант 3.
Рекомендуемый реагент для экстракции: реагент для выделения образца для макро- и микротестов. Образец мокроты необходимо промыть, добавив 1 мл физиологического раствора к вышеупомянутому обработанному осадку таллома, центрифугировать при 13000 об/мин в течение 5 минут, после чего надосадочную жидкость удалить (оставьте 10–20 мкл надосадочной жидкости). Для получения чистых мазков из колоний и ректальных мазков добавьте 50 мкл реагента для выделения образца непосредственно к вышеупомянутому обработанному осадку таллома, а последующие этапы экстракции следует проводить в соответствии с инструкцией по применению.
