Ген устойчивости к карбапенемам (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Название продукта
Набор для обнаружения генов устойчивости к карбапенемам HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (флуоресцентная ПЦР)
Эпидемиология
Карбапенемы — это атипичные β-лактамные антибиотики с самым широким антибактериальным спектром и самой сильной антибактериальной активностью. Благодаря своей устойчивости к β-лактамазам и низкой токсичности, они стали одним из важнейших антибактериальных препаратов для лечения тяжелых бактериальных инфекций. Карбапенемы обладают высокой устойчивостью к плазмидным β-лактамазам расширенного спектра действия (ESBL), хромосомам и плазмидным цефалоспориназам (ферментам AmpC).
Канал
| ПЦР-смесь 1 | ПЦР-смесь 2 | |
| СЕМЬЯ | ИМП | ВИМ |
| ВИК/ХЕКС | Внутренний контроль | Внутренний контроль |
| CY5 | НДМ | КПК |
| РОКС | OXA48
| OXA23 |
Технические параметры
| Хранилище | ≤-18℃ |
| Срок годности | 12 месяцев |
| Тип образца | Мокрота, чистые колонии, ректальный мазок |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103КОЕ/мл |
| Специфичность | а) Набор позволяет обнаружить стандартизированные отрицательные эталонные образцы компании, и результаты соответствуют требованиям соответствующих эталонных образцов. b) Результаты теста на перекрестную реактивность показывают, что данный набор не имеет перекрестной реакции с другими респираторными патогенами, такими как Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, респираторный аденовирус, Enterococcus, или образцами, содержащими другие гены лекарственной устойчивости CTX, mecA, SME, SHV, TEM и др. c) Антиинтерференционные тесты: для проверки на интерференцию были выбраны муцин, миноциклин, гентамицин, клиндамицин, имипенем, цефоперазон, меропенем, гидрохлорид ципрофлоксацина, левофлоксацин, клавулановая кислота и рокситромицин. Результаты показали, что указанные интерферирующие вещества не оказывают интерференционного воздействия на обнаружение генов устойчивости к карбапенемам KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM и IMP. |
| Применимые инструменты | Системы ПЦР в реальном времени Applied Biosystems 7500 Системы ПЦР в реальном времени QuantStudio®5 Системы ПЦР в реальном времени SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Система ПЦР в реальном времени LightCycler®480 Система обнаружения ПЦР в реальном времени LineGene 9600 Plus (ФКД-96А，ХанчжоуБиоэр-технология) Термоциклер реального времени MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Система ПЦР в реальном времени BioRad CFX96 Система ПЦР в реальном времени BioRad CFX Opus 96 |
Рабочий процесс
Вариант 1.
Рекомендуемый реагент для экстракции: универсальный набор для выделения ДНК/РНК Macro & Micro-Test (HWTS-301).9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (который можно использовать с автоматическим экстрактором нуклеиновых кислот Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) производства Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Добавьте 200 мкл физиологического раствора к осадку таллома. Дальнейшие шаги следует выполнять в соответствии с инструкциями по экстракции, рекомендуемый объем элюции составляет100 мкл.
Вариант 2.
Рекомендуемый реагент для экстракции: реагент для экстракции или очистки нуклеиновых кислот (YDP302) производства Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Экстракцию следует начинать строго в соответствии с шагом 2 инструкции по применению (добавьте 200 мкл буфера GA к осадку таллома и встряхивайте до полного растворения таллома). Для элюции используйте воду, не содержащую РНКазы/ДНКазы, рекомендуемый объем элюции составляет 100 мкл.
Вариант 3.
Рекомендуемый реагент для экстракции: реагент для высвобождения образцов Macro & Micro-Test. Образец мокроты необходимо промыть, добавив 1 мл физиологического раствора к вышеупомянутому обработанному осадку таллома, центрифугировать при 13000 об/мин в течение 5 минут, а надосадочную жидкость удалить (сохранить 10-20 мкл надосадочной жидкости). Для получения чистой колонии и ректального мазка добавить 50 мкл реагента для высвобождения образцов непосредственно к вышеупомянутому обработанному осадку таллома, а последующие этапы экстракции следует проводить в соответствии с инструкцией по применению.
