1. Эпидемия денге: предпосытки глобального вызова для общественного здравоохранения.

Денге — это острое вирусное заболевание, передаваемое комарами и вызываемое вирусом денге (DENV), которое стало самым быстро распространяющимся арбовирусным заболеванием в мире, представляя собой существенную угрозу для безопасности общественного здравоохранения. За последние два десятилетия глобальная заболеваемость денге резко возросла, при этом число зарегистрированных случаев удваивается ежегодно с 2021 года [1]. В декабре 2023 года Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила глобальную чрезвычайную ситуацию в связи с денге для усиления скоординированных международных усилий по реагированию. Эпидемиологические оценки ВОЗ показывают, что примерно 3,9 миллиарда человек во всем мире подвержены риску заражения денге, при этом ежегодно регистрируется около 390 миллионов случаев инфицирования, из которых 96 миллионов проявляются в виде клинически выраженных случаев [1,2].

2. Основные эпидемиологические моменты

Эпидемиологические характеристики денге формируются под влиянием взаимодействия вирусологических факторов, экологии переносчиков, иммунного ответа организма-хозяина и социально-экологических условий. Всестороннее понимание этих характеристик имеет важное значение для разработки эффективных стратегий профилактики и контроля, а также точных методов диагностики.

2.1 Векторы передачи и модели передачи в городах

Вирус денге передается преимущественно черезAedes aegypti и Aedes albopictusКомары. Среди этих видов-переносчиков Aedes aegypti признан наиболее важным переносчиком, характеризующимся высокой «адаптивностью к человеку» и широким распространением в тропических и субтропических городских условиях. В отличие от других комаров-переносчиков арбовирусных патогенов, Aedes aegypti обладает следующими ключевыми эпидемиологическими характеристиками:

- Предпочтение размножению в антропогенных средах (например, в емкостях для хранения воды, выброшенных шинах).

- Сильная тропность к человеческой крови как источнику питательных веществ.

-Дневное поведение при кормлении

Эти характеристики определяют денге как типичное заболевание.«городское инфекционное заболевание»при этом эффективность передачи значительно повышается в густонаселенных районах. Исследования ВОЗ показали, что в условиях высокой плотности населения в городах увеличение частоты контакта комаров с людьми может существенно повысить базовое репродуктивное число (R₀) вируса денге, тем самым ускоряя распространение эпидемий [2].

2.2 Глобальные тенденции распространения и движущие факторы

Согласно отчетам ВОЗ, число зарегистрированных случаев денге в мире за последние два десятилетия увеличилось в геометрической прогрессии [1,3]. Эта тенденция к росту в основном обусловлена ​​следующими взаимосвязанными факторами:

(1) Изменение климата: Повышение глобальных температур не только расширяет географический ареал подходящих местообитаний для комаров-переносчиков, но и сокращает внешний инкубационный период вируса денге в организме комара-хозяина, тем самым повышая эффективность передачи. ВОЗ подтвердила, что вызванные изменением климата колебания плотности популяции комаров являются надежным предиктором пространственно-временной динамики вспышек денге.

(2) Урбанизация: Быстрое и незапланированное расширение городов создало обильные места размножения комаров-переносчиков, а увеличение плотности населения усилило непрерывность цепочек передачи вируса денге.

(3) Глобальное перемещение населения: Международные поездки и торговля способствовали быстрой трансграничной передаче вируса денге, стимулируя переход от завозных случаев к устойчивой местной передаче. Данные эпидемиологического надзора ВОЗ показывают, что в период с 2010 по 2021 год в Соединенных Штатах было зарегистрировано 7528 случаев денге, связанных с поездками, из которых 3135 потребовали госпитализации, а 19 закончились летальным исходом.

(4) Расширение распространения переносчиков: В глобальном масштабе географический ареал комаров Aedes aegypti и Aedes albopictus продолжает расширяться, при этом комары Aedes все чаще обосновываются в некоторых частях Европы. Следовательно, денге превратилась из традиционно региональной эпидемии в глобальную угрозу для общественного здравоохранения.

2.3 Механизмы одновременной циркуляции нескольких серотипов и повторного заражения

Вирус денге включает четыре антигенно различных серотипа (DENV-1 — DENV-4). Инфекция одним серотипом обеспечивает долговременный защитный иммунитет против этого конкретного серотипа, но лишь временную и частичную перекрестную защиту от трех других серотипов. Население в целом восприимчиво к DENV, и лишь у части инфицированных лиц развивается клиническое заболевание [2].

В эндемичных регионах часто одновременно циркулируют несколько серотипов вируса денге, что может привести к тому, что человек перенесет несколько случаев денге в течение своей жизни. Эпидемиологические исследования ВОЗ выявили одновременную циркуляцию нескольких серотипов как ключевой фактор периодических вспышек денге [1].

2.4 Вторичная инфекция и антителозависимое усиление

Критически важным и уникальным явлением в эпидемиологии денге являетсяантителозависимое усиление (ADE)Во время вторичной инфекции гетерологичным серотипом DENV не нейтрализующие антитела, вырабатываемые во время первичной инфекции, облегчают проникновение вируса в моноциты и макрофаги, тем самым усиливая репликацию вируса. Этот механизм широко признан ВОЗ как основной патогенный фактор при тяжелых формах денге, включая геморрагическую лихорадку денге и синдром шока денге [1].

Эпидемиологические данные ВОЗ последовательно показывают, что у лиц с вторичной инфекцией денге значительно выше риск развития тяжелого заболевания по сравнению с лицами с первичной инфекцией — характеристика, имеющая большое значение для эпидемиологического надзора и клинического лечения. Важно отметить, что, хотя риск тяжелого заболевания повышается при вторичной инфекции, инфекция любым серотипом вируса денге потенциально может привести к тяжелой форме денге [1].

2.5 Неспецифические клинические проявления и риск ошибочной диагностики

Клинические проявления денге отличаются неспецифичностью, особенно на ранних стадиях заболевания, часто совпадая с симптомами других вирусных инфекций, передаваемых комарами (например, вирусов чикунгунья и Зика), а также некоторых респираторных инфекций. По оценкам ВОЗ, 40-80% случаев заражения вирусом денге протекают бессимптомно [3].

К типичным клиническим проявлениям относятся:

- Острая лихорадка (продолжающаяся от 2 до 7 дней, которая может быть двухфазной)

-Сильная головная боль и ретроорбитальная боль (боль за глазами)

- Боли в мышцах и суставах (часто называемые «ломающей кости лихорадкой»)

-Макулярная или макулопапулезная сыпь

-Легкие геморрагические проявления (например, экхимозы, носовые кровотечения, кровотечения из десен)

Симптоматическая лихорадка денге обычно делится на три отдельные фазы: лихорадочную фазу, критическую фазу и фазу выздоровления. Приблизительно менее 5% пациентов с симптомами переходят в тяжелую форму лихорадки денге. Из-за отсутствия специфических клинических признаков диагностика, основанная исключительно на клинических симптомах, затруднена, что увеличивает риск ошибочной и недостаточной диагностики. ВОЗ прямо подчеркивает, что одной лишь клинической диагностики недостаточно для обеспечения точности, поэтому лабораторное подтверждение является необходимым [1].

 Три ключевых момента из документа ВОЗ «Лабораторное тестирование на вирус денге: временные рекомендации, апрель 2025 г.»

В апреле 2025 года Всемирная организация здравоохранения опубликовала обновленные временные рекомендации по лабораторному тестированию на вирус денге, содержащие авторитетные технические указания по глобальной диагностике денге. Эти рекомендации обобщают последние данные о лабораторном тестировании на денге в контексте продолжающейся глобальной чрезвычайной ситуации, связанной с денге, и предлагают практические рекомендации, адаптированные к условиям с различным уровнем ресурсов.

3.1 Основные принципы стратегии тестирования

В рекомендациях подчеркивается, что для диагностики денге необходимо применять комбинированную стратегию тестирования с использованием нескольких маркеров в зависимости от стадии заболевания [1]. Учитывая отсутствие универсального диагностического алгоритма, стратегии тестирования должны быть адаптированы к местным эпидемиологическим условиям с учетом следующих ключевых факторов [1]:

- Стадия инфекции: количество дней после появления симптомов определяет наиболее подходящий метод тестирования.

-Тип образца: пригодность цельной крови, плазмы или сыворотки для обнаружения вируса денге.

Региональная эпидемиология: циркулирующие в регионе серотипы вируса денге и сопутствующая циркуляция других арбовирусов.

- Риск коинфекции: В регионах с перекрывающимися очагами циркуляции арбовирусов следует рассмотреть возможность проведения мультиплексного тестирования для различения различных патогенов.

3.2 Стратегия поэтапного тестирования

Согласно рекомендациям ВОЗ, лабораторное тестирование на денге должно проводиться в четко определенные временные рамки в зависимости от стадии заболевания [1,2]:

(1) Тестирование острой фазы (≤7 дней после начала заболевания)

- Тестирование нуклеиновых кислот (молекулярное тестирование): Обратная транскрипция-полимеразная цепная реакция (ОТ-ПЦР) и другие молекулярные методы позволяют с высокой чувствительностью выявлять РНК вируса денге.

-Антигенное тестирование: выявление антигена NS1, который становится обнаруживаемым в течение 1-3 дней после начала заболевания.

В острой фазе уровень виремии относительно высок, и тестирование на нуклеиновые кислоты и антигены обеспечивает оптимальную чувствительность.

(2) Тестирование в фазе выздоровления (≥4 дней после начала заболевания)

-Серологическое тестирование: антитела IgM обычно начинают обнаруживаться примерно на 4-й день после начала заболевания.

В большинстве случаев антитела IgM сохраняются в организме в течение 14-20 дней, а в некоторых случаях их концентрация может достигать 90 дней.

Тестирование на IgG имеет ограниченную ценность для диагностики острой лихорадки денге из-за потенциального наличия перекрестно-реагирующих антител, образовавшихся в результате перенесенной ранее инфекции флавивирусами или вакцинации.

(3) Алгоритм диагностики подозрительных случаев

В рекомендациях представлен диагностический алгоритм для случаев подозрения на денге, предлагающий соответствующие методы тестирования в зависимости от количества дней после появления симптомов: тестирование на антиген NS1 и тестирование на нуклеиновые кислоты являются основными подходами на ранней стадии, а серологическое тестирование — основным методом на поздней стадии.

3.3 Оценка и выбор характеристик метода испытаний

Согласно ВОЗ, систематическая оценка эффективности и сценариев применения различных методов тестирования на денге выглядит следующим образом:

4 Рекомендации по продуктам для макро- и микротестирования на выявление денге в зависимости от сценария

Для поддержки профилактики и контроля денге компания Macro & Micro-Test предлагает интегрированный диагностический портфель, включающий экспресс-скрининг, молекулярное подтверждение и геномный мониторинг, удовлетворяющий потребности на различных этапах управления вспышками заболеваний.

4.1 Сценарий 1: Экспресс-скрининг и целенаправленное наблюдение

Применимо к клиникам для пациентов с лихорадкой, учреждениям первичной медико-санитарной помощи, скринингу населения на вспышки заболеваний и карантину в портах/на границах.

- Экспресс-тест на антиген NS1 вируса денге: выявляет раннюю стадию инфекции (через 1-3 дня после начала заболевания) и предоставляет результаты через 15 минут для быстрой сортировки пациентов.

- Тест на антитела IgM/IgG к вирусу денге: позволяет различить первичную и вторичную инфекцию и оценить риск тяжелого течения заболевания.

— Экспресс-тест на антиген NS1 вируса денге + IgM/IgG: одновременно выявляет антиген и антитела для полной диагностики.

- Тест на антитела IgM/IgG к вирусу чикунгунья: позволяет провести дифференциальную диагностику с лихорадкой денге и точно определить возбудителей.

4.2 Сценарий 2: Точная диагностика и реагирование на чрезвычайные ситуации

- Набор для обнаружения нуклеиновых кислот вируса денге I/II/III/IV: выявляет и дифференцирует 4 серотипа (предел обнаружения 500 копий/мл) для отслеживания вспышек заболевания.

- Лиофилизированный набор для ПЦР-тестирования вируса денге: подходит для транспортировки при комнатной температуре, для регионов с ограниченными ресурсами и внезапных вспышек заболевания.

- Мультиплексный набор для ПЦР в реальном времени для выявления денге/зика/чикунгунии: позволяет одновременно обнаруживать 3 арбовируса для эффективной дифференциальной диагностики при сложных вспышках заболеваний.

Все вышеперечисленные реагенты совместимы с полностью автоматизированной системой AIO 800 «От образца до результата», что снижает необходимость ручной работы и риск перекрестного загрязнения, а также повышает эффективность и биобезопасность.

4.3 Сценарий 3: Геномный надзор и анализ вирусных линий

Применимо к национальным референс-лабораториям, научно-исследовательским учреждениям в области общественного здравоохранения и соответствует позиции ВОЗ в отношении секвенирования нового поколения (NGS).

Решения Macro & Micro-Test для геномного эпидемиологического надзора поддерживают полногеномное секвенирование для отслеживания вирусов, уточнения цепочек передачи, мониторинга вариантов и корректировки стратегии вакцинации. Они поддерживают ручные/автоматизированные рабочие процессы, повышая производительность и воспроизводимость, позволяя лабораториям перейти от рутинного тестирования к расширенному эпидемиологическому надзору в соответствии с акцентом ВОЗ на усиление мониторинга вирусной эволюции.

4.4 Ценность интегрированных решений

Компания Macro & Micro-Test предоставляет комплексные диагностические решения для выявления арбовирусов, поддерживая каждый этап управления вспышками заболеваний: инструменты экспресс-скрининга для медицинских учреждений, молекулярное подтверждение для точной диагностики и возможности полногеномного анализа для эпидемиологического надзора. Благодаря высокоэффективным анализам, гибким рабочим процессам и платформам, готовым к автоматизации, эти решения позволяют лабораториям и системам общественного здравоохранения повысить готовность и эффективность реагирования на возникающие угрозы арбовирусов во всем мире.

Ссылки

[1] Всемирная организация здравоохранения. Лабораторное тестирование на вирус денге: Временные рекомендации, апрель 2025 г. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2025.

[2] Техническая консультативная группа Глобальной инициативы ВОЗ по арбовирусам. Укрепление глобальной готовности и реагирования на угрозы арбовирусных заболеваний: призыв к действию. Lancet Infect Dis. 2026;26(1):15-17.

[3] «Ланцет Микроб». Преодоление дилеммы диагностики денге. «Ланцет Микроб». 2025;6(7):101190.